Metoda PCR (polymerázová řetězová reakce) je "zlatým standardem" moderní DNA diagnostiky, vysoce citlivé metody molekulární biologie. Metoda PCR se používá v lékařství, genetice, kriminologii a dalších oblastech. Často a úspěšně se používá při diagnostice mnoha infekčních onemocnění.
Diagnostika infekčních onemocnění pomocí PCR
Test PCR umožňuje detekovat nejen samotný patogen, ale i jediný fragment cizorodé DNA v zkoumaném materiálu. Zkoumaným (biologickým) materiálem jsou: žilní krve, epiteliální buňky a tajemství genitálního traktu, spermií, slin, sputa a dalších biologických exkrementů. Požadovaný biologický materiál je určen údajnou nemocí.
Metoda PCR v naší době samozřejmě je silným diagnostickým nástrojem. Snad jedinou nevýhodou studia je její vysoká cena.
V seznamu nemocí, jejichž přítomnost může být stanovena metodou PCR:
- virové a bakteriální pneumonie;
- tuberkulóza;
- spalničky, zarděnky, parotitis;
- infekční hepatitida všech forem;
- salmonelóza, záškrtu;
- Helikobakterióza a onemocnění způsobená střevními infekcemi;
- STD (pohlavně přenosné nemoci): kapavka, chlamydia, ureaplasmóza, syfilis, AIDS, genitální herpes, gardnerellez a další.
Screening STI pomocí metody PCR
Na rozdíl od tradičních analýz umožňuje PCR technika detekci sexuálně přenosných infekcí (ITS), i když jejich příznaky zcela chybějí. Pro shromažďování biologického materiálu jsou ženy vymývány epiteliální buňky cervikálního kanálu, muži - škrábání močové trubice. Pokud je to nutné, metoda PCR provádí studii žilní krve.
Test STI pomocí metody PCR tak umožňuje identifikovat:
- virus viru lidské imunodeficience (HIV);
- bledý treponemus (příčinný účinek syfilisu);
- Virus viru herpes simplex a cytomegalovirus;
- lidský papilomavirus (HPV);
- chlamydie, toxoplasmy, mykoplazmy, ureaplasma a jiné sexuální infekce.
Pokud je analýza PCR provedena správně, pravděpodobnost falešně pozitivních výsledků je vyloučena. Samostatně je třeba zmínit lidský papilomavírus (HPV) a význam metody PCR pro jeho diagnózu. Na rozdíl od onkocytologického nátěru metoda PCR může určit specifický typ HPV, zejména jeho onkogenní typy 16 a 18, jejichž přítomnost ohrožuje ženu s tak závažným a často smrtelným onemocněním, jako je rakovina děložního čípku . Včasná detekce onkogenních typů HPV metodou PCR často poskytuje příležitost zabránit vzniku rakoviny děložního čípku.
Imunoenzymová analýza (ELISA) a metoda polymerázové řetězové reakce (PCR): plusy a mínusy
Která diagnostická metoda je lepší: PCR nebo ELISA? Správná odpověď na tuto otázku neexistuje, neboť v podstatě diagnóza s pomocí těchto dvou studií má jiné účely. A častěji se používají metody IFA a PTSR v komplexu.
Test PCR je nezbytný k určení specifického původu infekce, může být detekován ihned po infekci, a to i přes nepřítomnost symptomatického projevu onemocnění. Tato metoda je ideální pro detekci skrytých a chronických bakteriálních a virových infekcí.
Na rozdíl od metody PCR je metoda ELISA navržena tak, aby nezjistila příčinu infekce, ale imunitní odpověď organismu na ni, tj. Detekci přítomnosti a množství protilátek vůči určitému patogenu. V závislosti na typu zjištěných protilátek (IgM, IgA, IgG) lze určit stupeň vývoje infekčního procesu.
Obě metody a PCR a ELISA mají vysokou spolehlivost (100 a 90%). Je však důležité poznamenat, že analýza testu ELISA v některých případech dává falešně pozitivní výsledky (pokud byla v minulosti nemocná určitá nemoc) nebo falešně negativní (pokud došlo k relativně nedávné infekci).